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DNA/RNA热稳定连接酶

产品编号 产品名称 规格 价格(元) 说明书
D2902A DNA/RNA热稳定连接酶 10T 300
D2902B 100T 2,000
5’App DNA/RNA热稳定连接酶来自嗜热碱甲烷杆菌(Methanobacterium thermoautotrophicum),是RNA连接酶催化亚基的赖氨酸点突变体。该热稳定DNA/RNA连接酶催化的连接反应不依赖于ATP,但需要5’预腺苷化的接头才能将其连接到RNA或单链DNA 的3’OH末端。该酶也可催化3’端被2’-O-甲基化的RNA和5’预腺苷化接头的连接反应。连接反应的最适反应温度为 60-65℃。即使在ATP存在的情况下,该连接酶也不能使RNA或单链DNA的5’端磷酸发生腺苷化,因此降低非特异性的串联和环化。该酶为热稳定型,最佳反应温度为 65℃,此温度下降低了RNA的二级结构,大大提高连接效率。

组分

组分名称 数量
Thermostable 5’AppDNA/RNA Ligase (20pmol/μl) 50μl
10×App DNA/RNA Ligase Buffer 100μl
50 mM MnCl2 100μl

应用

  • 二代测序文库构建中连接单链DNA和腺苷化的DNA接头。
  • 构建小RNA二代测序文库,可在较高温度下连接预腺苷化的接头和RNA。
  • 储存

    -20℃可保存3年。

    使用注意事项

    1. 1× AppDNA/RNA Ligase Buffer:10mM Bis-Tris-Propane- HCl pH 7.0,10mM MgCl2,1mM DTT。
    2. 该酶只能连接5’-端预腺苷化的Oligo接头到单链DNA或RNA的3’-OH基团
    3. 当腺苷化底物的5’-端第一个碱基为“C”时,连接效率较差。