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T4 RNA 连接酶1

产品编号 产品名称 规格 价格(元) 说明书
D2703 T4 RNA 连接酶1 1,000U 400
D2703 10KU 3,000
T4 RNA 连接酶1催化3’→5’磷酸二酯键的形成,使核苷酸的5’-磷酸末端和3’-羟基末端连接,伴随着ATP水解为AMP和PPi。T4 RNA 连接酶1的作用底物包括单链RNA、DNA及二核苷焦磷酸,它可催化ssDNA和RNA的连接,相对于ssDNA,该酶对RNA分子的连接和环化效率更高。 T4 RNA连接酶I

组分

组分名称 数量
T4 RNA Ligase1 (10 U/μl) 100μl
10×T4 RNA Ligase Buffer 250μl
10mM ATP 100μl
50% PEG 8000 500μl

应用

  • 连接单链RNA和DNA
  • RNA 3’末端标记
  • RNA和DNA分子内和分子间连接
  • 合成单链寡脱氧核苷酸
  • 蛋白质中掺入非天然氨基酸
  • 活性定义

    1单位指在1×T4 RNA Ligase Buffer 中,37℃条件下,30分钟内将1nmol的5’-[32P]rA16转化为磷酸盐不溶物质所需要的酶量。

    储存

    -20℃可保存3年。

    使用注意事项

    1.1× T4 RNA Ligase Buffer:50mM Tris-HCl pH 7.5,10mM MgCl2,1mM DTT。该酶反应时需要加入终浓度1mM ATP。
    2. 最佳反应温度37℃,65℃ 10min可使该酶失活。
    3. 该酶的连接底物无论是ssDNA还是ssRNA均需要5’-磷酸化或预腺苷化。
    4. 该酶不能连接双链DNA或RNA。
    5. 加入终浓度5~10% PEG 8000或增加孵育时间可提高连接效率。