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RIPA裂解液

产品编号 产品名称 规格 价格(元) 说明书
C1901 RIPA裂解液(IP&Co-IP用) 100 ml 150
C2501 超强RIPA裂解液(WB用) 100 ml 200
对目的蛋白进行检测分析时,总蛋白的提取至关重要,如蛋白提取不好会导致后续试验的不理想甚至失败,如:信号极弱或无杂交信号、背景高、非特异性条带多等.根据目标蛋白的类型和实验应用种类来选择合适的RIPA裂解液,才能最大程度地保证后续实验的成功。

普通RIPA裂解液对细胞有一定的裂解能力,能获得较多的胞浆蛋白,而对细胞核的裂解能力有限,不能完全裂解细胞核,因此获得的总蛋白适用于IP或CO-IP实验;而超强RIPA裂解液对动物组织和细胞的裂解能力极强,它可以完全裂解细胞核和线粒体,并可提取到更多的膜蛋白,从而可获得更多的总蛋白。因其超强的裂解能力,使得大量的基因组DNA从细胞核中释放出来,使蛋白变的十分粘稠,使用Benzonase核酸酶消化可有效解决。经海基RIPA裂解液获得得蛋白可用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度;使用Bradford法测定由本裂解液裂解所得到样品的蛋白浓度会稍有误差。

普通RIPA裂解液 超强RIPA裂解液
1.可很好的释放胞浆蛋白,部分释放膜蛋白
和核蛋白。
2.经普通RIPA裂解后,核蛋白与DNA还紧密结
合在一起,离心后会造成核蛋白的丢失。
3.对于膜蛋白,普通RIPA的破坏力小,不能
使膜蛋白与膜充分分离,故离心后造成膜蛋白
的丢失。
4.在提取蛋白过程中,基因组DNA释放使得蛋
白提取液变的十分粘稠,影响蛋白电泳和杂交
效果。
  1.可以很好的裂解细胞膜及细胞核,从而更好的完全释放胞浆蛋白、核蛋白和膜蛋白。
2.对于核蛋白,经超强RIPA裂解后,核蛋白与粘稠的基因组DNA分离,离心后核蛋白存在于上清中,核蛋白的捕获率高达90%。
3.对于膜蛋白,超强RIPA可最大程度的破坏细胞膜和变性蛋白,使蛋白与膜分离,防止蛋白与膜复合物在离心后沉淀,从而防止蛋白丢失。
4.在提取蛋白过程中,基因组DNA释放使得蛋白提取液变的十分粘稠,使用Benzonase核酸酶消化可有效解决。
储存
置于室温阴凉处,可保存2年。
实例
超强RIPA裂解液
Fig.用普通RIPA裂解液和超强RIPA裂解液分别提取核蛋白PPARγ和膜蛋白PLD-1,上样量分别为40ug和10ug总蛋白,ECL发光液显色。A/C泳道为超强RIPA裂解液,B/D泳道为普通RIPA裂解液。由此图比较分析表明超强RIPA裂解液能更充分的释放核蛋白和膜蛋白,从而获得更强的信号。
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