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5XHi TaqMan qPCR Mix(UNG)

产品编号 产品名称 规格 价格(元) 说明书
A2305A 5XHi TaqMan qPCR Mix(UNG) 100T 600
A2305B 500T 2500
由于PCR对核酸的扩增效率极高,在诊断PCR实验中,非常容易造成移液器、台面、PCR仪、空气等气溶胶污染。当实验环境被污染后,会导致阴性样本的假阳性结果。本TaqMan探针法定量试剂中,将dNTP中的dTTP全部更换为dUTP,从而使得扩增后的PCR产物中包含dU碱基。在随后的实验中,含有气溶胶污染的dU PCR产物,将被本试剂中的UNG糖基化酶降解,从而去除了气溶胶的污染效应,本试剂中的UNG酶在37度孵育2分钟,即可消除高达10万个Copy的核酸污染物。因此,本制品是诊断定量PCR检测的最佳试剂。
5XHi TaqMan qPCR Mix(UNG)将化学修饰的热启动Taq DNA聚合酶、UNG酶、反应Buffer、dUTP/NTP Mixture等试剂预混在一起,是一种5×浓度的单组分预混试剂,进行实验时,PCR反应液的配制十分方便简单,只需加入引物、探针、模板、水即可。
5XHi TaqMan qPCR Mix(UNG)中的DNA聚合酶为化学法修饰的Hot Start Taq DNA 聚合酶,该酶在50℃以下100%无活性,只有95℃条件下加热15min后才能完全恢复酶的活力。因此该系统可以有效抑制非特异性PCR扩增,极大的提高了PCR扩增特异性。该试剂盒独特的反应缓冲液,可在宽范围中得到良好的扩增结果、检测灵敏度更高、信号更强。该制品配有单独的ROX内参染料,使得该试剂可应用于所有RealTime PCR机型。

组分

名称 100T×20 μl 500T×20 μl
5×Hi TaqMan qPCR Mix(UNG) 0.4 ml 0.4 ml×5
50×ROX Reference Dye 200 μl 200 μl

主要特征

  • 热启动酶采用化学修饰,100%热启动
  • 引入UNG,可高效消除气溶胶污染
  • 单组份预混液,使用方便快捷
  • 高特异性,有效抑制非特异性扩增
  • 高灵敏度,可检测低丰度基因
  • 适用于所有实时定量PCR仪器
  • 应用

    基因检测和基因诊断试剂开发。

    注意事项

    1.于-20℃保存时容易形成沉淀,可用手轻握或室温放置一段时间后,颠倒混匀待其完全融解后使用。
    2. 本制品请避光保存(短期6个月内使用可置于4℃),使用频率低时置于-20℃,反复冻融会使制品性能下降。
    3.配制反应液时,注意避免强光照射,并于冰上操作。

    储存

    1、长期保存,请避光置于-20℃或-70℃可保存3年。
    2、经常使用,融化后可置于4℃,可保存1年。 注:长期-20℃保存可能会出现沉淀,室温融化后混合均匀,不影响试剂性能。

    反应实例

    Fig. 以pUC57质粒为模板,将该模板进行8个4倍稀释,第8个稀释梯度中模板拷贝数为10copy/μl,用5XHi TaqMan qPCR Mix(UNG)进行扩增检测,每个反应体系加模板2μl,如图所示,A:本制品在宽广的模板量区间内具有卓越的线性关系:扩增效率 97.5%,R2 =0.9995。 B:测试UNG去除DNA污染的能力,向反应体系中加入105copy的含dUTP的PCR产物,分别用普通5xHi TaqMan PCR Mix(B1)和5xHi TaqMan PCR Mix (UNG)(B2)做定量PCR。从图中可以看出:UNG可很好的去除105copy 的气溶胶污染。C:图A扩增的标准曲线。