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G5U Plus HiFi PCR Mix(超保真G5 Plus PCR Mix)

产品编号 产品名称 规格 价格(元) 说明书
A3208-02 G5U Plus HiFi PCR Mix 1 ml(20 μl×100T) 200
10 ml(20 μl×1000T) 1500
G5U Plus High-Fidelity DNA Polymerase, 由HaiGene分子酶进化平台(in silico Design & invitro Evolution Workflow)筛选获得,其融合Q5Q5U DNA聚合酶的性能于一体,使其成为一酶多用的全能选手。G5U Plus DNA聚合酶来源于高保真DNA聚合酶,并加入了增强的延伸结构,使其具有长片段扩增、高产、快速扩增能力。强压力筛选的外切活性区域,使其具有超保真性能(与Q5同水平),底物活性中心的改造,使其具有dUTP渗入的能力和扩增含尿嘧啶模板的能力。 G5U Plus DNA聚合酶具有4kb/min以上的延伸速度,可轻松扩增8kb的基因组DNA、20kb的λDNA。该酶具有5’-3’的聚合酶活性、强3’-5’的外切酶活性,产物为平末端。

许多具有高保真扩增性能的聚合酶来为 B型 DNA 聚合酶,在遇到 DNA 模板中的尿嘧啶碱基时停止复制。 G5U Plus删除了尿嘧啶结合域,使其能够读取和扩增含有尿嘧啶的模板,该性能赋予其独特的“U” 特征。该特征有两个重要的应用方向:(1)用于超保真扩增重亚硫酸氢盐转化、脱氨基、或受损 DNA;(2)在超保真扩增中搭配dUTP和热敏UDG,用于防止 PCR 体系中携带污染。此外,也多用于USER 克隆。

HotStart G5U Plus DNA聚合酶是具有热启动功能的版本,由独特适配体封闭酶活性中心,在反应结束恢复室温后,适配体可逆的重新封闭聚合酶。其热启动功能确保在25℃以下无活性,高于50℃后迅速恢复100%活性。热启动功能便于室温建立反应体系、有效的降低低温下的非特异扩增、提高多重超保真扩增效果,使超保真扩增达到最佳。

 

主要特征

  • 超保真扩增:与Q5 DNA聚合酶同水平的保真性能,是载体构建、点突变、NGS模板扩增、基因合成的最佳用酶。
  • 识别dUTP底物:能够读取和扩增含有尿嘧啶的模板,具有“U” 特征。
  • 防污染扩增:在PCR扩增中可以使用dUTP完全替代dTTP,建立防污染高保真扩增。
  • 快速扩增:具有4kb/min的扩增能力。
  • 长片段扩增:质粒、λDNA 等简单模板>20 kb,复杂基因组模板>8 kb。

单位定义

一个活力单位即在72°C条件下,30分钟内催化10 nmol dNTP的掺入反应成为酸不溶性物质所需的酶量。

储存

(1)酶储存液:10mM Tris-HCl,pH7.6,100mM NaCl,0.05% Tween20, 1mM DTT,0.5mM EDTA,50%甘油。
(2)置于-20°C以下,可保存3年。

功能性测试(该数据来自HaiGene实验室,未经允许不得转载!)

1.不同长度片段的扩增图(最高到20kb)
G5U Plus 超高保真DNA聚合酶
2.不同酶量的扩增性能
G5U Plus 超高保真DNA聚合酶
3.模板扩增灵敏度展示
G5U Plus 超高保真DNA聚合酶
4.高GC含量模板的扩增
G5U Plus 超高保真DNA聚合酶
5.扩增dUTP模板性能
G5U Plus 超高保真DNA聚合酶
6.保真度
G5U Plus 超高保真DNA聚合酶
7.HotStart G5U Plus DNA Polymerase热启动性能展示
热启动G5U Plus 超高保真DNA聚合酶