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Bst 4.0 Lyophilized Bead(冻干微球)

LAMP技术学习资料
产品编号 产品名称 规格 价格(元) 说明书
A3824-01 Bst 4.0 LS MasterMix(Low Salt)
(可用于红黄变色,可视化检测,可冻干)
100T(25ul体系) 1650
A3824-02 Bst 4.0 Basic MasterMix
(可用于橙绿变色,可视化检测,可冻干)
100T(25ul体系) 1650
A3824-03 Bst 4.0 SYBR Green MasterMix
(可用于定量PCR仪或恒温荧光仪,可冻干)
100T(25ul体系) 1650
A3824-10 Bst 4.0 SYBR Green Mix(with UDG) 100T(20ul体系) 2,000
冻干微球系列
本方案所制备的含引物成品试剂,稳定性室温>6个月
A3828-01 Lyo Bst 4.0 LS Bead(Low Salt)
(可用于红黄变色,可视化检测)
100T(25ul体系) 2450
A3828-02 Lyo Bst 4.0 Basic Bead
(可用于橙绿变色,可视化检测)
100T(25ul体系) 2450
A3828-03 Lyo Bst 4.0 SYBR Green Bead
(可用于定量PCR仪或恒温荧光仪)
100T(25ul体系) 2450
恒温扩增冻干微球,>1万次,询价!
可用于恒温扩增可视化检测的辅助化学品试剂
A3828-21 OG 橙绿变色管(用于橙绿变色) 96支(25ul体系) 750
A3828-22 红色pH指示染料管(可用于红黄变色) 96支(25ul体系) 询价
A3828-23 10x红色pH指示染料(可用于红黄变色) 500T(25ul体系) 询价
A3828-24 LAMP专用核酸释放剂 50ml 400
HaiGene开发的扩增特异性高、速度快、灵敏度高的引物组,可用于性能比对和对照测试
LP1002 COVID 19-ORF1ab LAMP Primer Set
(扩增特异性高、速度快、灵敏度高的引物组)
50T(25ul体系) 500
在核酸分子的恒温扩增过程中,无论采用LAMP、CPA等扩增技术,这种高速度的扩增特性,均不可避免的引起假阳性扩增。这种假阳性的扩增情况在LAMP扩增中表现尤为明显,由于LAMP扩增用到很高浓度的引物,因此难免保证有少量错配和引物Dimer,这些轻微的污染都会导致在LAMP高速扩增中造成假阳性。HaiGene优化的反应缓冲液,配合独有的显色技术和阴性控制技术建立的预混恒温mix系列产品,可高灵敏度、高特异性的用于LAMP红黄变色、LAMP 橙绿(OG)变色、 LAMP SYBR Green荧光检测。在LAMP扩增实验中,与其它公司提供的 DNA/RNA LAMP MasterMix 或 LAMP Mix相比,得益于 Bst 4.0 DNA/RNA聚合酶的出色性能,HaiGene的 Bst 4.0 MasterMix具有更快的扩增速度和杂质耐受性。
在此基础上,HaiGene对该系列产品的生产工艺进行升级,推出全体系冻干微球恒温扩增系列,该系列产品使得诊断试剂的稳定性、易用性、运输便利性大幅提升。全体系恒温冻干微球采用HaiGene专有的微球冻干工艺制备,品型均一、不易碎、长效储存、避免冷链运输。对于开发诊断试剂盒,可将引物烘干于EP反应管底部,加入一粒冻干微球后即可成为全扩增体系的冻干制品,因此试剂性能更加稳定、便于保存和运输。

Bst 4.0 MasterMix及冻干微球系列特点

  Bst 4.0 MasterMix Bst 4.0冻干微球
特点 单一组分预混液 全体系冻干微球
运输 -20℃以下保存、运输 室温运输
有效期 -20℃,1-2年 室温>6个月,-20℃>2年
扩增用酶 Bst 4.0 DNA/RNA聚合酶,较Bst大片段、2.0、3.0该酶具有更为出色的扩增能力。无论DNA模板还是RNA模板,均适用,无需添加任何其它辅助用酶。
显色形式 SYBR Green荧光法、红黄变色法、橙绿变色法
反应温度 恒温60-68℃

Bst 4.0 MasterMix恒温扩增系统显色方法的性能特点

  SYBR Green 可红黄变色 橙绿变色
液体组分 A3824-03 A3824-01 A3824-02
冻干微球 A3828-03 A3828-01 A3828-02
显色染料 SYBR Green 可配套红色染料管
(A3828-22)
配套OG管
(A3828-21)
检测方法 定量PCR或 恒温荧光仪 裸眼观察 裸眼观察
阳性判读方式 扩增曲线 黄色为阳性 绿色为阳性
反应时间 10-20min 20-30min 15-20min
灵敏度(copies/test 5-25 copies 10-50 copies 5-25 copies
单copy检出率 20-40% 10-20% 20-40%
假阳性比例 <0.1% <0.5% <0.1%
抗杂质能力 +++++ 对样本ph敏感 +++++
适用样本 全部 拭孖 全部

实例展示

1、LAMP红黄变色反应(裸眼观察)
在以A3824-01或 A3828-01 搭配红色pH指示染料管( A3828-22)条件下,用 LP1002引物组进行COVID-19的LAMP测试。A3824-01和 A3828-01均为低缓冲盐形式提供,其可搭配pH敏感型染料进行变色反应(A3828-22为非必需耗材,有经验的开发人员可自行设计相关染料)。以2019-nCoV体外转录RNA为模板,1-6分别为1、10、100、1000、104和106Copy,NTC为ddH2O为模板。上图为加样结束反应起始前,下图为65度反应30min 后。
LAMP红黄变色反应
2、LAMP橙绿变色反应(裸眼观察)
在以A3824-02或 A3828-02搭配OG变色管( A3828-21)条件下,用 LP1002引物组进行COVID-19的LAMP测试。OG变色法为终点变色策略,在反应结束后,倒置反应管,溶解管盖上染料后,阳性样本呈现出醒目的绿色,阴性表现出橙色,区分明显。且该方法不受样本类型限制,杂质耐受性极佳。以2019-nCoV体外转录RNA为模板,1-6分别为1、10、100、1000、104和106Copy,NTC为ddH2O为模板。下图为65度反应20min后检测结果。
LAMP橙绿变色反应
3、SYBR Green荧光检测(便携式恒温检测仪)
在以A3824-03或 A3828-03,用 LP1002引物组进行COVID-19的LAMP测试。Bst4.0 SYBR Green试剂可在标准定量PCR仪或恒温荧光仪上进行反应。以2019-nCoV体外转录RNA为模板,1-6分别为1、10、100、1000、104和106Copy,NTC为ddH2O为模板。下图为65度反应25min的检测结果,可以看到检测反应<20min(达平台期)。
LAMP荧光扩增反应
4、dUTP防污染系统
首先使用含dUTP的Bst4.0 SYBR Green Mix扩增获得三种基因产物(AFSV P72,Covid-19 N Gene-1,Covid-19 N Gene-2),然后以105拷贝的含U产物作为模板,分别用Bst4.0 SYBR Green Mix(with UDG)和Bst4.0 SYBR Green MasterMix 进行扩增,反应结束后统计两组之间的Ct,结果为:UDG组在30min内几乎不起峰,无信号;未加UDG组均在4min之前起峰,表明该Bst4.0 SYBR Green Mix(with UDG)具有良好的去除残留模板的能力。
LAMP防污染扩增