3GmTTx DNA/RNA qPCR Mix(可冻干)—HaiGene创新性酶|新海基因检测有限公司

3GmTTx DNA/RNA qPCR Mix(可冻干)—HaiGene创新性酶

————超级耐热逆转录酶：应用于粗样本直扩qPCR，改变分子诊断的形式与格局

产品编号	产品名称	规格	价格(元)	说明书
A3206-06	5xdU-3GmTTx DNA/RNA qPCR Mix	100Tx20µl	550
		500Tx20µl	2,350
A3206-07	预混3GmTTx qPCR冻干瓶x	100Tx20µl	650
		500Tx20µl	2,600
A3206-08	3GmTTx qPCR冻干球(with UDG)	96Tx20µl	800
		480Tx20µl	3,250

3GmTTx DNA/RNA qPCR试剂中包含HaiGene改造的热启动极度耐热逆转录酶(Extreme ThermoStable Reverse Transcriptase, ET RTase)，该酶耐受95℃高温，可高效的逆转录500nt的RNA。因此，其不再局限于37~50℃条件下的逆转录，可以采用任意温度条件下对RNA进行cDNA逆转录（仅取决于引物的退火温度）。除此外，在同一管中，粗样本直接加热裂解-释放核酸、逆转录、PCR扩增变为成为可能，这将变革现有分子诊断试剂形式和仪器设备。ET RTase改造自耐热DNA聚合酶，经电子重构架技术，修改了酶的活性配体中心，使其不再依赖Mn²⁺，仅需要Mg²⁺即具有极强的逆转录活性，这消除了Mn²⁺对PCR的抑制。ET RTase同样经化学修饰，仅经过95℃加热5min后才能恢复活性。

HaiGene TaqMan探针qPCR试剂性能说明
	dU-Chemi3G DNA Probe Mix (A2259-04)	冻干瓶Chemi3G DNA试剂 (A2259-05)	dU-3GmTTx DNA/RNA Mix (A3206-06)	冻干瓶3GmTTx DNA/RNA试剂 (A3206-07)	冻干球3GmTTx DNA/RNA试剂 (A3206-08)
检测底物	DNA	DNA	DNA/RNA	DNA/RNA	DNA/RNA
是否可用于冻干	是	是	是	是	是
核苷酸底物	dUTP	dUTP	dUTP	dUTP	dUTP
热启动功能	是	是	是	是	是
是否含UDG	否	否	否	否	是
逆转录酶	无		热启动的ET RTase(耐受95℃)，粗样本加热裂解释放RNA，并用于后续逆转录生成cDNA，一步完成裂解、RT、PCR。
特色	95℃ 5min热启动		95℃ 5min （热启动与核酸释放） 55~75℃ 10min (逆转录成cDNA) 【95℃ 10s, 60℃ 30s】x40 (PCR扩增检测)

功能测试

（该实验结果来自HaiGene实验室，未经允许，不得转载）

1.使用5xChemi 3GmTTx DNA/RNA qPCR Mix以人RNA total RNA（100 ng – 0.1 pg，10 倍梯度稀释）对Actin 基因进行qPCR 检测，分别进行95℃ 2min组和不加热组进行比较，每个浓度的样品做 3 个复孔。在两组 qPCR检测中，基因靶标都可有效扩增，Ct数无明显差异，说明ET Reverase Transcriptase（极度耐热反转录酶）在95℃加热 2min后保留全部活性。极耐热反转录酶

2.使用5xChemi 3GmTTx DNA/RNA qPCR Mix以人total RNA（10 ng – 0.1 pg）和MS2 RNA（0.1 ng – 0.1fg）进行单重（左）和双重（右）qPCR检测。在双重qPCR和单重qPCR检测中，两个基因靶标都可有效扩增，Ct数无明显差异。一步法rt—qpcr预混液

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