产品编号 |
产品名称 |
规格 |
价格(元) |
说明书 |
D2902A |
DNA/RNA热稳定连接酶 |
10T |
300 |
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D2902B |
100T |
2,000 |
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5’App DNA/RNA热稳定连接酶来自嗜热碱甲烷杆菌(Methanobacterium thermoautotrophicum),是RNA连接酶催化亚基的赖氨酸点突变体。该热稳定DNA/RNA连接酶催化的连接反应不依赖于ATP,但需要5’预腺苷化的接头才能将其连接到RNA或单链DNA 的3’OH末端。该酶也可催化3’端被2’-O-甲基化的RNA和5’预腺苷化接头的连接反应。连接反应的最适反应温度为 60-65℃。即使在ATP存在的情况下,该连接酶也不能使RNA或单链DNA的5’端磷酸发生腺苷化,因此降低非特异性的串联和环化。该酶为热稳定型,最佳反应温度为 65℃,此温度下降低了RNA的二级结构,大大提高连接效率。 |
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组分
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组分名称 |
数量 |
Thermostable 5’AppDNA/RNA Ligase (20pmol/μl) |
20μl |
10×App DNA/RNA Ligase Buffer |
100μl |
50 mM MnCl2 |
100μl |
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应用
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- 二代测序文库构建中连接单链DNA和腺苷化的DNA接头。
- 构建小RNA二代测序文库,可在较高温度下连接预腺苷化的接头和RNA。
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储存
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-20℃可保存3年。 |
使用注意事项
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1. 1× AppDNA/RNA Ligase Buffer:10mM Bis-Tris-Propane- HCl pH 7.0,10mM MgCl2,1mM DTT。
2. 该酶只能连接5’-端预腺苷化的Oligo接头到单链DNA或RNA的3’-OH基团
3. 当腺苷化底物的5’-端第一个碱基为“C”时,连接效率较差。 |