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| T4 RNA连接酶1(T4 RNA Ligase1)催化3’→5’磷酸二酯键的形成，使核苷酸的5’-磷酸末端和3’-羟基末端连接，伴随着ATP水解为AMP和PPi。 | |||||||||||||||
应用 |
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单位定义 |
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| • 1单位指在1×T4 RNA Ligase Buffer 中，37℃条件下，30分钟内将1nmol的5’-[32P]rA16转化为磷酸盐不溶物质所需要的酶量。 | |||||||||||||||
储存 |
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| -20°C可保存3年，避免反复冻融。 | |||||||||||||||
注意事项 |
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| （1）1× T4 RNA Ligase Buffer：50 mM Tris-HCl pH 7.5，10 mM MgCl2，1 mM DTT。该酶反应时需要加入终浓度1 mM ATP。 （2）最佳反应温度37℃，65℃ 10min可使该酶失活。 （3）该酶的连接底物无论是ssDNA还是ssRNA均需要5’-磷酸化或预腺苷化。 （4）该酶不能连接双链DNA或RNA。 （5）加入终浓度20% PEG 8000或增加孵育时间可提高连接效率。 |
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功能测试（该实验结果来自HaiGene实验室，未经允许，不得转载） |
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