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CCK8细胞增殖与毒性检测试剂

产品编号 产品名称 规格 价格(元) 说明书
M2701 CCK8细胞增殖与毒性检测试剂 100次(1ml) 200
CCK-8细胞增殖与毒性检测试剂是一种基于WST-8的广泛应用于细胞增殖和细胞毒性检测的试剂,因其操作简单快速、高灵敏度且细胞毒性低等成为替代MTT法检测细胞生长密度的最好方法。该试剂盒利用水溶性四唑盐-WST?-8在电子载体1-Methoxy PMS存在的情况下能够被还原成水溶性的甲臜染料,生成的甲臜量与活细胞数量成正比。细胞增殖越多越快,则颜色越深;细胞毒性越大,则颜色越浅。对于同样的细胞,颜色的深浅和细胞数目呈线性关系。
优势
  • 灵敏度高,数据重复性好
  • 操作简单,安全性高
  • 细胞毒性低,无需放射性同位素
  • 单一组分,无需配制
  • 应用
    细胞增殖测定、细胞毒性测定、药物筛选、肿瘤药敏试验
    储存
    -20℃避光可保存2年,融化后 4℃避光放置可保存 1 年。反复冻融会增加背景值。
    注意事项
    1. 接种时注意细胞悬液一定要混匀,以避免细胞沉淀下来,导致每孔中的细胞数量不等,可以每接种几个孔就混匀一下。培养板周围一圈孔培养基容易挥发,为了减少误差,建议培养板的四边每孔只加培养基或PBS,而不作为指标检测孔。
    2. 本试剂盒的检测依赖于脱氢酶催化的反应,如果待检测体系中存在较多的还原剂,例如一些抗氧化剂会干扰检测,需设法去除。
    3. 用酶标仪检测前需确保每个孔内没有气泡,否则会干扰测定。
    4. 培养时间根据细胞种类的不同和每孔内细胞数量的多少而异。一般情况下,白细胞较难染色,因此需要较长的培养时间或增加细胞数量 (~105个细胞/孔)。悬浮细胞与贴壁细胞相比较难染色。对于悬浮细胞,在培养1- 4小时后,可先从培养箱中取出,目察染色程度或用酶标仪测定决定。若染色困难,可将培养板放回培养箱,继续培养数小时后再确定。 染色的最佳时间可定为悬浮细胞的最佳培养时间。对于贴壁细胞,培养时间一般为1-4小时,但在培养30分钟左右即可取出肉眼观察染色程度 (根据细胞种类而定,需要摸索一下条件)。
    5. 若细胞培养时间较长,培养基颜色发生变化或 pH发生变化,建议更换新鲜的培养基后再加CCK-8试剂。
    引用文献
  • C1q tumor necrosis factor-related protein-3 protects mesenchymal stem cells against hypoxia- and serum deprivation-induced apoptosis through the phosphoinositide 3-kinase/Akt pathway. Int J Mol Med. 2014 Jan; 33(1): 97-104. PMID: 24212403.
  • Molecular hydrogen regulates the expression of miR-9,miR-21 and miR-199 in LPS-activated retinal microglia cells. Int J Ophthalmol. 2013 Jun 18; 6(3): 280-5. PMC3693006.
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