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Bst3.0 DNA/RNA Polymerase

产品编号 产品名称 规格 价格(元) 说明书
A3901A Bst3.0 DNA Polymerase 1600U 500
A3901B 16KU 3,000
与Bst DNA 聚合酶(大片段)相比,Bst 3.0 DNA/RNA 聚合酶具有更佳的等温扩增活性和更强的逆转录活性。无论以DNA还是RNA为模板,Bst3.0 DNA/RNA 聚合酶都具有5’-3’的DNA聚合酶活性和强烈的链置换活性,但该酶5’-3’和3’-5’的外切酶活性缺失。 在以RNA为模板的LAMP实验中,可实现单酶系统反应。该酶在60-70℃之间具有很好的反转录活性,可有效解决具有二级复杂结构的RNA模板的反转录,而Bst DNA 聚合酶(大片段)无此活性。

主要特征

  • 同时具有较强的延伸能力和逆转录活性
  • 耐热性能极强,对于复杂模板的扩增活性强
  • 强烈的链置换活性,可应用于LAMP检测
  • 组分

    组分名称 数量
    Bst3.0 DNA Polymerase (8 U/μl) 200 μl
    10×Bst Buffer 1 ml×2
    100mM MgSO4 500 μl

    单位定义

    一个活力单位即在65°C条件下,30分钟内催化25nmol dNTP的掺入反应成为酸不溶性物质所需的酶量。

    应用

    • 恒温PCR扩增
    • DNA LAMP和RT-LAMP
    • 链置换基因合成
    • 在60-70度之间具有反转录活性,可用于单管RT-PCR

    储存

    -20℃可保存3年。
    LAMP引物设计与实验指南
    **本公司免费为客户设计LAMP引物,需要设计引物者请来信咨询,Email:info@haigene.cn.

    实例

    LAMP实验

    3173 LAMP实验

    A:以pEasy质粒为模板,应用Bst3.0 DNA聚合酶和六对引物进行LAMP实验(70℃,30min),1-6分别为:模板0、5ng、2.5ng、1.5ng、1ng、0.5ng,M:DNA Marker2000;B:以140ng human RNA为模板,应用Bst3.0 DNA聚合酶和六对引物进行LAMP实验(70℃,30min),1-3:140ng human RNA为模板,4:不加模板,M:M:DNA Marker2000;

    使用方法

    1.以DNA/RNA为模板进行LAMP扩增
    反应体系配制
    Bst3.0 DNA Polymerase (8 U/μl)               0.25-1 μl
    10×Bst Buffer                                              2.5 μl
    dNTP Mixture (10 mM each)                         3.5 μl
    模板RNA                                              1 ng~1 μg
    100mM MgSO4                                           1.5 μl
    *10×Primers                                                 2.5 μl
    ddH2O                                               Up to 25 μl
    70℃孵育30min~1h。
    *10×LAMP Primer Mix:
    各引物组分: FIP/BIP: 16 μM each;Loop F/R: 4 μM each; F3/B3: 2 μM each

    注意事项

    1. MgSO4的使用浓度为4~10 mM浓度,1×Bst Buffer中已包含2 mM MgSO4,可自行调整。
    2. 有文献报道加入Tte Uvrd解旋酶可改善LAMP的效果。
    3. 使用无模板作为对照检测扩增的特异性。