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热敏型双链DNA特异性核酸酶(HL dsDNase)

产品编号 产品名称 规格 价格(元) 说明书
C5010 热敏型双链DNA特异性核酸酶(HL dsDNase) 100U 400 双链DNA特异性核酸酶说明书
1,000U 3,000
热敏双链DNA特异性核酸酶(Heat labile ds-DNA-specific Nuclease,又名ezDNase或HL dsDNase),为双链特异性核酸酶。其特异性的识别降解双链DNA,对单链DNA或RNA几乎无活性,其降解dsDNA的能力比ssDNA高~5000倍。除此外,该双链DNA特异性核酸酶降解双链DNA的能力比bovine DNaseI高~30倍,因此特别适用于去除RNA样品中的基因组DNA污染。该热敏型双链DNA核酸酶可将DNA降解为2~8bp的产物,且55℃ 5min可使该酶不可逆失活,同时又能保持RNA和ssDNA的稳定性,因此产物无需再纯化,可直接用于后续反应。同时该酶与M-MLV和AMV的反应Buffer都是兼容的,可应用于反转录反应中去除样本中基因组DNA的污染,提高反转录效率。

单位定义

1单位指在25℃标准反应条件下,每分钟OD260增加0.001(约每分钟消化1pmol核酸底物)所需的酶量。

组分

名称 数量
HL dsDNase (2 U/μl) 50 μl/500 μl
10×dsDNase Buffer 1 ml /2 ml

储存

置于-20°C,可保存3年。

使用注意事项

((1)1×dsDNase Buffer:20mM Tris-HCl pH8, 2mM MgCl2。该酶需要1~3mM MgCl2。
(2)该酶对DTT敏感,任何反应体系中不得包含DTT。
(3)通常在RT反应中的用量为0.1~0.5U/20 μl体系。
(4)任何浓度的SDS、盐酸胍、β-mercaptoethanol或高盐离子(>300mM)均抑制该酶活性。
(5)该酶的最佳反应温度为25~37℃,42℃ 30min后活性损失70%。